40分鐘內(nèi)，實(shí)現(xiàn)有毒蘑菇精準(zhǔn)檢測(cè)

　　蘑菇好吃，但因其中毒甚至中毒致死事件時(shí)有發(fā)生。近期，中國(guó)農(nóng)科院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所研究員陳愛(ài)亮團(tuán)隊(duì)針對(duì)常見(jiàn)有毒蘑菇，建立了以內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（ITS）為靶標(biāo)的環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）技術(shù)，通過(guò)實(shí)時(shí)熒光和可視化兩種檢測(cè)方法，可在40分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)有毒蘑菇的精準(zhǔn)特異性檢測(cè)，并且適用于蒸煮制品以及中毒后的胃液嘔吐物等，對(duì)蘑菇中毒的預(yù)防、快速檢測(cè)中毒事件中的有毒蘑菇以及中毒后的針對(duì)性治療和診斷具有重要意義。

　　陳愛(ài)亮告訴《中國(guó)科學(xué)報(bào)》，該團(tuán)隊(duì)聯(lián)合吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食藥用菌教育部工程研究中心，已收集我國(guó)常見(jiàn)毒蘑菇200余種，開(kāi)發(fā)有毒蘑菇鑒定試劑盒30種。相關(guān)研究成果發(fā)表于Food Control、Frontiers in microbiology、Journal of Food Composition and Analysis。

　　蘑菇作為一種大型子實(shí)體真菌在全球范圍內(nèi)廣泛分布，具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用功效。據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前世界上有超過(guò)1.4萬(wàn)種蘑菇，而在我國(guó)已知有3800種，有毒蘑菇約有480種。其中分布較廣，較為常見(jiàn)而易被誤食引發(fā)中毒的蘑菇有70余種。

　　“不少有毒蘑菇具有與可食蘑菇相似的形態(tài)特征，難以用肉眼分辨?！标悙?ài)亮介紹，我國(guó)每年發(fā)生多起由誤食有毒蘑菇引起的食物中毒事件。根據(jù)《中國(guó)疾病預(yù)防控制中心周報(bào)（英文）》發(fā)布的我國(guó)蘑菇中毒案例統(tǒng)計(jì)報(bào)告，自2010—2020年，食源性疾病爆發(fā)檢測(cè)系統(tǒng)共報(bào)告蘑菇中毒事件1萬(wàn)起，導(dǎo)致近4萬(wàn)人患病、2萬(wàn)余人人住院和近800人死亡。因誤食蘑菇而引發(fā)的食物中毒事件逐年增加，僅2020年就發(fā)生蘑菇中毒事件676起，涉及患者1719人，死亡25人，總死亡率為1.45%。蘑菇中毒已成為我國(guó)亟需解決的食品安全問(wèn)題之一。

　　實(shí)際上，不同種類的毒蕈含有多種毒素，可導(dǎo)致不同的中毒癥狀。盡管大多數(shù)人誤食有毒蘑菇后能夠得到良好的治愈，但誤食引發(fā)肝、腎損害，橫紋肌溶解和溶血等癥狀的有毒蘑菇后可能會(huì)危及生命。因此，早期的準(zhǔn)確識(shí)別，中毒后的及時(shí)診斷和治療是降低蘑菇中毒死亡率關(guān)鍵所在。

　　在由有毒蘑菇引起的食物中毒事件中，蘑菇樣品經(jīng)煮熟和人體消化后會(huì)失去其原始形態(tài)特征，因此無(wú)法通過(guò)形態(tài)學(xué)方法對(duì)其完成鑒定。目前已開(kāi)發(fā)多種蘑菇物種鑒定技術(shù)，其中基于DNA的分子生物學(xué)技術(shù)是使用最廣泛的方法。

　　陳愛(ài)亮介紹，傳統(tǒng)的基于PCR擴(kuò)增的分子生物學(xué)檢測(cè)方法具有檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，檢測(cè)儀器依賴程度高等弊端，無(wú)法適用于現(xiàn)場(chǎng)的快速檢測(cè)。LAMP技術(shù)是一種等溫?cái)U(kuò)增方法，可在恒定溫度（約65℃）下進(jìn)行擴(kuò)增。因此，一個(gè)簡(jiǎn)單的水浴或金屬浴裝置即可完成反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)果可通過(guò)基于顏色變化的可視化方法和基于擴(kuò)增曲線的實(shí)時(shí)熒光方法進(jìn)行結(jié)果判斷。其中可視化法的反應(yīng)產(chǎn)物肉眼可見(jiàn)，僅依靠水浴即可實(shí)現(xiàn)，無(wú)需昂貴的設(shè)備；實(shí)時(shí)熒光法可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)反應(yīng)過(guò)程，可更為直觀的表征檢測(cè)結(jié)果，且有利于對(duì)假陽(yáng)性結(jié)果的辨別。

　　目前，陳愛(ài)亮團(tuán)隊(duì)正加緊開(kāi)發(fā)更多種類的有毒蘑菇快速鑒定試劑盒以及高通量的有毒蘑菇篩查試劑盒，爭(zhēng)取覆蓋我國(guó)常見(jiàn)的全部70余種有毒蘑菇，以充分滿足我國(guó)疾控以及基層醫(yī)院等單位有毒蘑菇快速鑒定的的需求。

　　相關(guān)論文信息：

　　https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2021.108301

　　https://doi.org/10.3389/fmicb.2021.638315

　　https://doi.org/10.1016/j.jfca.2021.104169