質(zhì)粒

簡介

質(zhì)粒是附加到細(xì)胞中的非細(xì)胞的染色體或核區(qū)DNA原有的能夠自主復(fù)制的較小的DNA分子(即細(xì)胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質(zhì)粒雖然都是環(huán)狀構(gòu)型，它存在于許多細(xì)菌以及酵母菌等生物中，乃至于植物的葉綠體和線粒體等胞器中。然而，1984年，在Streptomyces coelicoler(天藍(lán)色鏈霉菌)等放線菌以及在Borrelia hermsii(赫氏蜱疏螺旋體)等原核生物中，又相繼發(fā)現(xiàn)線形質(zhì)粒。

天然質(zhì)粒的DNA長度從數(shù)千堿基對至數(shù)十萬堿基對都有。質(zhì)粒天然存在于這些生物里面，有時(shí)候一個(gè)細(xì)胞里面可以同時(shí)有一種乃至于數(shù)種的質(zhì)粒同時(shí)存在。質(zhì)粒的套數(shù)(copy number)在細(xì)胞里從單一到數(shù)千都有可能。有時(shí)有些質(zhì)粒含有某種抗藥基因(如大腸桿菌中就有含有抗四環(huán)素基因的質(zhì)粒)。有一些質(zhì)粒攜帶的基因則可以賦予細(xì)胞額外的生理代謝能力，乃至于在一些細(xì)菌中提高它的致病力。一般來說，質(zhì)粒的存在與否對宿主細(xì)胞生存沒有決定性的作用。它是基因工程最常見的運(yùn)載體。

分類

**根據(jù)質(zhì)粒能否通過細(xì)菌的接合作用，可分為接合性質(zhì)粒和非接合性質(zhì)粒。**接合性質(zhì)粒帶有與接合傳遞有關(guān)的基因。非接合質(zhì)粒在一定條件下通過與其共存的接合質(zhì)粒的誘動(dòng)或轉(zhuǎn)導(dǎo)而傳遞。

**根據(jù)質(zhì)粒在細(xì)菌內(nèi)的復(fù)制類型可分為兩類：嚴(yán)緊控制型和松弛控制型。**嚴(yán)緊控制復(fù)制型質(zhì)粒的復(fù)制酶系與染色體DNA復(fù)制共用，只能在細(xì)胞周期的一定階段進(jìn)行復(fù)制，當(dāng)細(xì)胞染色體停止復(fù)制時(shí)，質(zhì)粒也就不再復(fù)制。松弛控制復(fù)制型的質(zhì)粒的復(fù)制酶系不受染色體DNA復(fù)制酶系的影響，在整個(gè)細(xì)胞生長周期中隨時(shí)都可以復(fù)制，在染色體復(fù)制已經(jīng)停止時(shí)質(zhì)粒仍能繼續(xù)復(fù)制。

**根據(jù)質(zhì)粒的不相容性，可分為不相容性和相容性。**不相容性指結(jié)構(gòu)相似、密切相關(guān)的質(zhì)粒不能穩(wěn)定地共存于同一宿主細(xì)菌內(nèi)的現(xiàn)象，反之為相容性。常用于流行病學(xué)的調(diào)查。

根據(jù)所帶有的基因以及賦于宿主細(xì)胞的特點(diǎn)可以分為六種不同的類型:

**1、抗性質(zhì)粒:**它們帶有抗性基因，可使宿主菌對某些抗菌素產(chǎn)生抗性，如對氨基芐青霉素，氯霉素等產(chǎn)生抗性。不同的細(xì)菌中也可含有相同的抗性質(zhì)粒，如RP4質(zhì)粒在假單胞菌屬和其它細(xì)菌中都存在。R質(zhì)粒還可以通過感染的形式在不同種的細(xì)菌中傳播。

**2、致育因子:**可以通過接合在供體和受體間傳遞遺傳物質(zhì)。F因子約有1/3的DNA構(gòu)成一個(gè)轉(zhuǎn)移DNA的操縱子，約35個(gè)基因，負(fù)責(zé)合成和裝配性傘毛。這就是DNA轉(zhuǎn)移區(qū)域，受traJ基因產(chǎn)物的正調(diào)節(jié)。它還具有重組區(qū)和復(fù)制區(qū)。重組區(qū)含有多個(gè)插入順序，通過這些插入順序進(jìn)行同源重組。在復(fù)制區(qū)有兩個(gè)復(fù)制起始點(diǎn):一個(gè)是OriV，供給F因子在宿主中自主復(fù)制時(shí)使用;另一個(gè)是OriT，供接合時(shí)進(jìn)行滾環(huán)復(fù)制的起始點(diǎn)。

**3、Col質(zhì)粒:**帶有編碼大腸桿菌素的基因。大腸桿菌素可殺死其它細(xì)菌。

**4、降解質(zhì)粒:**這種質(zhì)粒編碼一種特殊蛋白，可使宿主菌代謝特殊的分子，如甲苯或水楊酸。

**5、侵入性質(zhì)粒:**這些質(zhì)粒使宿主菌具有致病的能力。如Ti質(zhì)粒，此是在根癌農(nóng)桿菌中發(fā)現(xiàn)的，現(xiàn)經(jīng)過加工用來作植物轉(zhuǎn)基因的一種常用載體。

**6、隱秘質(zhì)粒:**不顯示任何表現(xiàn)類型，主要通過物理方法才能發(fā)現(xiàn)。（如酵母菌2微米質(zhì)粒）

細(xì)胞復(fù)制

大腸桿菌質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)示意圖質(zhì)粒在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制一般有兩種類型:緊密控制型(Stringent control)和松弛控制型(Relaxed control)。前者只在細(xì)胞周期的一定階段進(jìn)行復(fù)制，當(dāng)染色體不復(fù)制時(shí)，它也不能復(fù)制，通常每個(gè)細(xì)胞內(nèi)只含有一個(gè)或幾個(gè)質(zhì)粒分子，如F因子。后者的質(zhì)粒在整個(gè)細(xì)胞周期中隨時(shí)可以復(fù)制，在每個(gè)細(xì)胞中有許多拷貝，一般在20個(gè)以上，如 Col E1質(zhì)粒。在使用蛋白質(zhì)合成抑制劑-氯霉素時(shí)，細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成、染色體DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂均受到抑制，緊密型質(zhì)粒復(fù)制停止，而松弛型質(zhì)粒繼續(xù)復(fù)制，質(zhì)?？截悢?shù)可由原來20多個(gè)擴(kuò)增至1000-3000個(gè)，此時(shí)質(zhì)粒DNA占總DNA的含量可由原來的2%增加至40-50%。利用同一復(fù)制系統(tǒng)的不同質(zhì)粒不能在同一宿主細(xì)胞中共同存在，當(dāng)兩種質(zhì)粒同時(shí)導(dǎo)入同一細(xì)胞時(shí)，它們在復(fù)制及隨后分配到子細(xì)胞的過程中彼此競爭，在一些細(xì)胞中，一種質(zhì)粒占優(yōu)勢，而在另一些細(xì)胞中另一種質(zhì)粒卻占上風(fēng)。當(dāng)細(xì)胞生長幾代后，占少數(shù)的質(zhì)粒將會(huì)丟失，因而在細(xì)胞后代中只有兩種質(zhì)粒的一種，這種現(xiàn)象稱質(zhì)粒的不相容性(Incompatibility)。

質(zhì)粒載體

把一個(gè)有用的目的DNA片段通過重組DNA技術(shù)，送進(jìn)受體細(xì)胞中去進(jìn)行繁殖和表達(dá)的工具叫載體(Vector)。細(xì)菌質(zhì)粒是重組DNA 技術(shù)中常用的載體。質(zhì)粒分子本身是含有復(fù)制功能的遺傳結(jié)構(gòu)。質(zhì)粒還帶有某些遺傳信息，所以會(huì)賦予宿主細(xì)胞一些遺傳性狀。其自我復(fù)制能力及所攜帶的遺傳信息在重組DNA操作，如擴(kuò)增、篩選過程中都是極為有用的。

質(zhì)粒載體是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上為適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室操作而進(jìn)行人工構(gòu)建的。與天然質(zhì)粒相比，質(zhì)粒載體通常帶有一個(gè)或一個(gè)以上的選擇性標(biāo)記基因(如抗生素抗性基因)和一個(gè)人工合成的含有多個(gè)限制性內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)的多克隆位點(diǎn)序列，并去掉了大部分非必需序列，使分子量盡可能減少，以便于基因工程操作。大多質(zhì)粒載體帶有一些多用途的輔助序列，這些用途包括通過組織化學(xué)方法肉眼鑒定重組克隆、產(chǎn)生用于序列測定的單鏈DNA、體外轉(zhuǎn)錄外源DNA序列、鑒定片段的插入方向、外源基因的大量表達(dá)等。一個(gè)理想的克隆載體大致應(yīng)有下列一些特性:⑴分子量小、多拷貝、松弛控制型;⑵具有多種常用的限制性內(nèi)切酶的單切點(diǎn);⑶能插入較大的外源DNA片段;⑷具有兩個(gè)以上的遺傳標(biāo)記物，便于鑒定和篩選。⑸對宿主細(xì)胞無害。常用的質(zhì)粒載體大小一般在1kb至10kb之間，如PBR322、PUC系列、PGEM系列、PET系列和pBluescript(簡稱pBS)等。

不兼容性

利用同一復(fù)制系統(tǒng)的不同質(zhì)粒不能在同一宿主細(xì)胞中共同存在，當(dāng)兩種質(zhì)粒同時(shí)導(dǎo)入同一細(xì)胞時(shí), 它們在復(fù)制及隨后分配到子細(xì)胞的過程中彼此競爭。在一些細(xì)胞中，一種質(zhì)粒占優(yōu)勢，而在另一些細(xì)胞中另一種質(zhì)粒卻占上風(fēng)。當(dāng)細(xì)胞生長幾代后，占少數(shù)的質(zhì)粒將會(huì)丟失，因而在細(xì)胞后代中只有兩種質(zhì)粒的一種，這種現(xiàn)象稱質(zhì)粒的不相容性(Incompatibility)。但利用不同復(fù)制系統(tǒng)的質(zhì)粒則可以穩(wěn)定地共存于同一宿主細(xì)胞中。質(zhì)粒通常含有編碼某些酶的基因，其表型包括對抗生素的抗性，產(chǎn)生某些抗生素，降解復(fù)雜有機(jī)物，產(chǎn)生大腸桿菌素和腸毒素及某些限制性內(nèi)切酶與修飾酶等。

提取方法

從細(xì)菌中分離質(zhì)粒DNA的方法都包括3個(gè)基本步驟:培養(yǎng)細(xì)菌使質(zhì)粒擴(kuò)增;收集和裂解細(xì)胞;分離和純化質(zhì)粒DNA。采用強(qiáng)堿液、加熱或溶菌酶(主要針對革蘭氏陽性細(xì)菌)可以破壞菌體細(xì)胞壁，十二烷基磺酸鈉(SDS)和TritonX-100(一般很少使用)可使細(xì)胞膜裂解。經(jīng)溶菌酶和SDS或Triton X-100處理后，細(xì)菌染色體DNA會(huì)纏繞附著在細(xì)胞碎片上，同時(shí)由于細(xì)菌染色體DNA比質(zhì)粒大得多，易受機(jī)械力和核酸酶等的作用而被切斷成不同大小的線性片段。當(dāng)用強(qiáng)熱或酸、堿處理時(shí)，細(xì)菌的線性染色體DNA變性，而共價(jià)閉合環(huán)狀DNA(Covalently closed circularDNA，簡稱cccDNA)的兩條鏈不會(huì)相互分開，當(dāng)外界條件恢復(fù)正常時(shí)，線狀染色體DNA片段難以復(fù)性，而是與變性的蛋白質(zhì)和細(xì)胞碎片纏繞在一起，而質(zhì)粒DNA雙鏈又恢復(fù)原狀，重新形成天然的超螺旋分子，并以溶解狀態(tài)存在于液相中。在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)，共價(jià)閉環(huán)質(zhì)粒以超螺旋形式存在。在提取質(zhì)粒過程中，除了超螺旋DNA外，還會(huì)產(chǎn)生其它形式的質(zhì)粒DNA。如果質(zhì)粒DNA兩條鏈中有一條鏈發(fā)生一處或多處斷裂，分子就能旋轉(zhuǎn)而消除鏈的張力，形成松弛型的環(huán)狀分子，稱開環(huán)DNA(Open circularDNA，簡稱ocDNA);如果質(zhì)粒DNA的兩條鏈在同一處斷裂，則形成線狀DNA(LinearDNA)。當(dāng)提取的質(zhì)粒DNA電泳時(shí)，同一質(zhì)粒DNA其超螺旋形式的泳動(dòng)速度要比開環(huán)和線狀分子的泳動(dòng)速度快。

復(fù)制特性

質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子。在基因工程中質(zhì)粒常被用做目的基因的載體(Vector)。質(zhì)粒DNA分子上有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，供外源DNA片段(基因)插入其中。攜帶外源DNA片段的質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞后，在細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制，或整合到染色體DNA上，隨染色體DNA同步復(fù)制。質(zhì)粒DNA分子上有特殊的標(biāo)記基因，如四環(huán)素抗性基因，氨芐青霉素抗性基因等標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。

已發(fā)現(xiàn)有質(zhì)粒的細(xì)菌有幾百種，已知的絕大多數(shù)的細(xì)菌質(zhì)粒都是閉合環(huán)狀DNA分子(簡稱cccDNA)。細(xì)菌質(zhì)粒的相對分子質(zhì)量一般較小，約為細(xì)菌擬核的0.5%~3%。根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小，大致上可以把質(zhì)粒分成大小兩類:較大一類的相對分子質(zhì)量是40×106以上，較小一類的相對分子質(zhì)量是10×106以下(少數(shù)質(zhì)粒的相對分子質(zhì)量介于兩者之間)。每個(gè)細(xì)胞中的質(zhì)粒數(shù)主要決定于質(zhì)粒本身的復(fù)制特性。按照復(fù)制性質(zhì)，可以把質(zhì)粒分為兩類:一類是嚴(yán)緊型質(zhì)粒，當(dāng)細(xì)胞染色體復(fù)制一次時(shí)，質(zhì)粒也復(fù)制一次，每個(gè)細(xì)胞內(nèi)只有1~2個(gè)質(zhì)粒;另一類是松弛型質(zhì)粒，當(dāng)染色體復(fù)制停止后仍然能繼續(xù)復(fù)制，每一個(gè)細(xì)胞內(nèi)一般有20個(gè)左右質(zhì)粒。這些質(zhì)粒的復(fù)制是在寄主細(xì)胞的松弛控制之下的，每個(gè)細(xì)胞中含有10-200份拷貝，如果用一定的藥物處理抑制寄主蛋白質(zhì)的合成還會(huì)使質(zhì)?？截悢?shù)增至幾千份。如較早的質(zhì)粒pBR322即屬于松弛型質(zhì)粒，要經(jīng)過氯霉素處理才能達(dá)到更高拷貝數(shù)。一般分子量較大的質(zhì)粒屬嚴(yán)緊型。分子量較小的質(zhì)粒屬松弛型。質(zhì)粒的復(fù)制有時(shí)和它們的宿主細(xì)胞有關(guān)，某些質(zhì)粒在大腸桿菌內(nèi)的復(fù)制屬嚴(yán)緊型，而在變形桿菌內(nèi)則屬松弛型。

培養(yǎng)

在基因工程中，常用人工構(gòu)建的質(zhì)粒作為載體。人工構(gòu)建的質(zhì)?？梢约喾N有用的特征于一體，如含多種單一酶切位點(diǎn)、抗生素耐藥性等。常用的人工質(zhì)粒運(yùn)載體有pBR322、pSC101。pBR322含有抗四環(huán)素基因(Tcr)和抗氨芐青霉素基因(Apr)，并含有27種限制性內(nèi)切酶的單一識(shí)別位點(diǎn)。如果將DNA片段插入EcoRI切點(diǎn)，不會(huì)影響兩個(gè)抗生素基因的表達(dá)。但是如果將DNA片段插入到Hind Ⅲ、Bam H I 或 Sal I切點(diǎn)，就會(huì)使抗四環(huán)素基因失活。這時(shí)，含有DNA插入片段的pBR322將使宿主細(xì)菌抗氨芐青霉素，但對四環(huán)素敏感。沒有DNA插入片段的pBR322會(huì)使宿主細(xì)菌既抗氨芐青霉素又抗四環(huán)素，而沒有pBR322質(zhì)粒的細(xì)菌將對氨芐青霉素和四環(huán)素都敏感。pSC101與pBR322相似，只是沒有抗氨芐青霉素基因和PstI切點(diǎn)。質(zhì)粒運(yùn)載體的最大插入片段約為10 kb(kb表示為千堿基對)。

1973年，科學(xué)家將質(zhì)粒作為基因的載體使用，為基因工程的誕生奠定了基礎(chǔ)。

最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒。這種質(zhì)粒常含有抗生素抗性基因，例如，卡那霉素抗性基因。

pBR322質(zhì)粒

pBR322質(zhì)粒DNA分子的長度為4361bp*(*Sequencing data from Watson (confirmed at New England Biolabs, Inc.) has shown pBR322 to be 4,361 base pairs, not 4,363 base pairs as previously reported.)，此載體中有兩個(gè)標(biāo)記基因，一個(gè)是氨芐青霉素抗性基因(Apr)，另一個(gè)是四環(huán)素抗性基因(Tetr)。已知pBR322DNA分子共有24種核酸內(nèi)切限制酶的單一識(shí)別位點(diǎn)。其中7種限制酶(從12:00位置按順時(shí)針方向)即EcoRV、NheI、BamHI、SphI、SalI、XmaⅢ和NruI的識(shí)別位點(diǎn)位于四環(huán)素抗性基因內(nèi)部，另外有2 種限制酶即ClaI和HindⅢ的識(shí)別位點(diǎn)是存在于這個(gè)基因的啟動(dòng)區(qū)內(nèi)，在這9個(gè)限制位點(diǎn)上插入外源DNA都會(huì)導(dǎo)致tetr的失活。3種限制酶即ScaI、PvuI和PstI的識(shí)別位點(diǎn)位于氨芐青霉素抗性基因內(nèi)，在這些位點(diǎn)插入外源DNA則會(huì)導(dǎo)致ampr基因的失活。由pBR322質(zhì)粒載體的結(jié)構(gòu)可知其具有如下優(yōu)點(diǎn):⑴具有較小的分子量。經(jīng)驗(yàn)表明，為了避免在DNA的純化過程中發(fā)生鏈的斷裂，克隆載體的分子大小最好不要超過10Kb。pBR322質(zhì)粒這種小分子量的特點(diǎn)，不僅易于自身DNA的純化，而且可容納較大的外源DNA片段;⑵具有兩種抗菌素抗性基因可供作轉(zhuǎn)化子的選擇記號(hào)，能指示載體或重組DNA分子是否進(jìn)入宿主細(xì)胞以及外源DNA分子是否插入載體分子形成了重組子。標(biāo)記基因往往可以賦予宿主細(xì)胞一種新的表型，這種轉(zhuǎn)化細(xì)胞可明顯地區(qū)別于非轉(zhuǎn)化細(xì)胞。當(dāng)我們把一個(gè)DNA片段插入到某一個(gè)標(biāo)記基因內(nèi)時(shí)，該基因就失去了相應(yīng)的功能。當(dāng)把這種重組DNA分子轉(zhuǎn)到宿主細(xì)胞后，該基因原來賦予的表型也就消失了。要是仍保留了原來表型的轉(zhuǎn)化細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)含有的DNA分子一定不是重組子。很顯然，既要指示外源DNA是否進(jìn)入了宿主細(xì)胞，又要指示載體DNA分子中是否插入了外源DNA片段，那么這種載體必須至少具有兩個(gè)標(biāo)記基因。另外，pBR322質(zhì)粒載體還具較高的拷貝數(shù)，而且經(jīng)過氯霉素?cái)U(kuò)增之后，每個(gè)細(xì)胞中可積累1000~3000個(gè)拷貝，這就為重組體DNA的制備提供了極大的方便。

載體構(gòu)建

pBR322質(zhì)粒載體的構(gòu)建過程可簡單地概括如下:

1、由于pBR322質(zhì)粒的親本之一是pMB1質(zhì)粒，故首先以pMB1為基礎(chǔ)，引入Rldrd19質(zhì)粒的Tn3易位子，得到13.3kb的pMB3質(zhì)粒;

2、pMB3的分子量顯然使得它不適合作為載體，所以要通過在EcoRI活性條件下的消化讓它大部分的無用片段失去，留下來的小片段的DNA的黏性末端連接起來后就形成了pMB8質(zhì)粒(2.6kb);

3、此時(shí)，另外一種pSC101質(zhì)粒在EcoRI活性條件下消化產(chǎn)生了含有tetr抗性的DNA片斷，這個(gè)片斷和pMB8整合在一起就形成了pMB9質(zhì)粒(5.3kb)。此時(shí)pMB9為ampstetr表型;

4、pMB9已經(jīng)初步具備載體的功能，為了讓它更加完善，我們要讓它具備amprtetr性能，即在pMB9上引入pSF2124的Tn3易位子，但Tn3可以來也可以走，為了留住它，我們切去了Tn3中表達(dá)轉(zhuǎn)位酶的基因，形成了pBR313質(zhì)粒。

此后我們兵分兩路:一路把pBR313的PstI位點(diǎn)除去，使之成為ampstetr表型的pBR318質(zhì)粒;

5、;另一路把pBR313的EcoRⅡ的位點(diǎn)切除，使之成為amprtets表形的pBR320質(zhì)粒。

由此我們的到了兩種功能互補(bǔ)的質(zhì)粒，這樣我們只要將他們雜交就可以得到一種接近全能的載體質(zhì)粒了，這就是pBR322。

應(yīng)用技術(shù)

了解了pBR322的結(jié)構(gòu)和它的構(gòu)建過程之后，我們來看pBR322在基因工程中的應(yīng)用。

pBR322質(zhì)粒作為一種常用的基因克隆載體，在實(shí)際應(yīng)用中有著非常重要的地位，其中一個(gè)突出的例子就是應(yīng)用pBR322 作為克隆載體對水稻的葉綠體光誘導(dǎo)基因psbA 進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析。

將水稻葉綠體的DNA，用EcoRI核酸限制性內(nèi)切酶消化之后，放入含有溴化乙錠的低熔點(diǎn)(LMP)的1%瓊脂糖凝膠中作電泳分離。從LMP中分離出分子大小為1.8~2.5kb之間的DNA片段，再與同樣經(jīng)過了EcoRI核酸限制性內(nèi)切酶切割并用堿性磷酸酶作了脫磷酸處理的pBR322質(zhì)粒連接。然后，將混合物轉(zhuǎn)化到大腸桿菌5346菌株，培養(yǎng)在氨芐青霉素選擇平板上，形成Ampr轉(zhuǎn)化子菌落群體。這樣就構(gòu)成了由EcoRI核酸限制性內(nèi)切酶切割的水稻葉綠體DNA基因組庫。用Ampr轉(zhuǎn)化子菌落與32P放射性標(biāo)記的玉米psbA DNA 探針作菌落雜交，可以分離出其中的陽性克隆體。從這些陽性克隆體中分離出來的重組體質(zhì)粒DNA，經(jīng)過進(jìn)一步的分析，就能測出水稻葉綠體基因psbA的序列。

利用pBR322作為載體重組人體的抑生長激素也是一個(gè)經(jīng)常提到的應(yīng)用例子。其過程和水稻葉綠體基因重組大同小異，只是除了在質(zhì)粒載體上插入抑生長激素基因外，還將含有l(wèi)ac操縱子起始部分的片段(包括啟動(dòng)子、操縱區(qū)、核糖體結(jié)合位點(diǎn)和β-半乳糖苷酶的主要部分)插在抑生長激素基因的旁邊。由于有了lac操縱子的控制，重組基因產(chǎn)生的蛋白質(zhì)的調(diào)節(jié)就變得比較容易了。

功能

質(zhì)粒具有自主復(fù)制能力，使其在子代細(xì)胞中也能保持恒定的拷貝數(shù)，并表達(dá)所攜帶的遺傳信息。細(xì)菌質(zhì)粒是DNA重組技術(shù)中常用的載體。載體是指把一個(gè)有用的外源基因通過基因工程手段，送進(jìn)受體細(xì)胞中去進(jìn)行增殖和表達(dá)的工具。將某種目標(biāo)基因片段重組到質(zhì)粒中，構(gòu)成重組基因或重組體。然后將這種重組體經(jīng)微生物學(xué)的轉(zhuǎn)化技術(shù)，轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞（如大腸桿菌）中，使重組體中的目標(biāo)基因在受體菌中得以繁殖或表達(dá)，從而改變寄主細(xì)胞原有的性狀或產(chǎn)生新的物質(zhì)。