[科普中國]-粗多糖

簡介

粗多糖是指復(fù)合型雜多糖，主要有黏多糖、脂多糖、結(jié)合多糖(糖蛋白及黏蛋白)等。隨著科技的發(fā)展，粗多糖的保健功能越來越引起人們的重視。

（1）促進(jìn)雙歧桿菌的增殖：人體雖然不能直接利用粗多糖，但是粗多糖可被腸內(nèi)細(xì)菌利用，并且能促進(jìn)雙歧桿菌的增殖。雙歧桿菌是一種厭氧革蘭氏陽性細(xì)菌，是維護(hù)和保持腸道菌群平衡的一個(gè)極為重要的因素，也是判斷腸內(nèi)外環(huán)境是否正常的一個(gè)可靠依據(jù)。

（2）抑制病原菌：大豆粗多糖能促進(jìn)雙歧桿菌的增殖，從而抑制有害細(xì)菌如產(chǎn)生莢膜梭狀芽孢桿菌的生長。雙歧桿菌能發(fā)酵粗多糖產(chǎn)生短鏈脂肪酸和一些抗菌素物質(zhì)，從而可抑制外源致病菌和腸內(nèi)固有腐敗細(xì)菌的生長繁殖。

（3）防止便秘、腹脹，促進(jìn)消化，調(diào)節(jié)胃腸功能：腸道內(nèi)的雙歧桿菌發(fā)酵粗多糖產(chǎn)生大量的短鏈脂肪酸（主要是醋酸和乳酸），能刺激腸道蠕動(dòng)，從而促進(jìn)消化，防止便秘的產(chǎn)生。

（4）增強(qiáng)免疫功能：如果人較長期的食用無細(xì)菌食物，腸道就會(huì)因?yàn)槿鄙俅碳ざ蛊洚a(chǎn)生抗體的能力下降，從而容易誘發(fā)疾病。食用粗多糖，促進(jìn)雙歧桿菌的增殖，將對腸道免疫細(xì)胞產(chǎn)生刺激，提高其產(chǎn)生抗體的能力從而起到防治疾病的效果3。

粗多糖的檢測測定方法1. 原理

分子量大于10，000道爾頓的多糖經(jīng)80%乙醇沉淀后，加入堿性銅試劑，選擇性地從其他高分子物質(zhì)中沉淀出葡聚糖，沉淀部分與苯酚-H2SO4反應(yīng)，生成有色物質(zhì)，在485nm條件下，有色物質(zhì)的吸光度值與葡聚糖濃度成正比。

2. 適用范圍

參照AOAC方法。適用于檢測含有分子量大于10，000道爾頓葡聚糖的樣品。

3.儀器

（1）分光光度計(jì)

（2） 離心機(jī)

（3） 旋轉(zhuǎn)混勻器

（4）恒溫水浴鍋

4.試劑

除特殊說明外，實(shí)驗(yàn)用水為蒸餾水，試劑為分析純。

（1） 80%乙醇：800ml無水乙醇加水200ml。

（2） 2.5 mol/L NaOH溶液：100 g NaOH加蒸餾水稀釋至1 L，加入固體無水硫酸鈉至飽和。

（3） 銅貯存液：稱取3.0 g CuSO4 ·5H2O，30.0 g檸檬酸鈉加水溶解至1 L。溶液可貯存2周。

（4） 銅應(yīng)用溶液：取銅貯存液50 ml，加水50 ml混勻后加入無水硫酸鈉12.5 g，臨用新配。

（5） 洗滌液：取水50 ml，加入10 ml銅應(yīng)用溶液，10 ml 2.5 mol/L NaOH溶液，混勻。

（6） 1.8 mol/L H2SO4：取100ml濃硫酸用水稀釋至1L。

（7） 20 g/L苯酚溶液：稱取2.0g苯酚，加水溶解并稀釋至100ml，混勻備用。

（8）葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)液：稱取500mg葡聚糖（分子量500,000D）于稱量皿中，105℃干燥4h至恒重，置于裝有干燥硅膠的干燥器中冷卻。準(zhǔn)確稱取100mg干燥后的葡聚糖，用水定容至100ml，葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)濃度為1.0mg/ml。

（9） 葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液：吸取葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)液10ml，用水稀釋10倍，葡聚糖終濃度為0.1mg/ml。

5. 操作方法

5.1 樣品處理

（1） 樣品提?。悍Q取樣品1～5g，加水100ml，沸水浴加熱2h，冷卻至室溫，定容至200ml（V1），混勻后過濾，棄初濾液，收集余下濾液。

（2） 沉淀高分子物質(zhì)：準(zhǔn)確吸取上述濾液100ml（V2），置于燒杯中，加熱濃縮至10ml，冷卻后，加入無水乙醇40ml，將溶液轉(zhuǎn)至離心管中以3000rpm離心5min，棄上清液，殘?jiān)?0%乙醇洗滌3次，殘?jiān)┏恋砥暇厶侵谩?/p>

（3） 沉淀葡聚糖：上述殘?jiān)盟芙?，并定容?0ml （V3），混勻后過濾，棄初始濾液后，取濾液2.0ml（V4），加入2.5mol/L NaOH2.0ml，Cu應(yīng)用溶液2.0ml，沸水浴中煮沸2mim，冷卻后以3000rpm離心5min，棄上清液，殘?jiān)孟礈煲合礈?次，殘?jiān)y定葡聚糖之用。

（4） 測定葡聚糖：上述殘?jiān)?.0mL 1.8mol/LH2SO4溶解，用水定容至100mL（V5）。準(zhǔn)確吸取2.0ml（V6），置于25ml比色管中，加入1.0ml苯酚溶液，10ml濃硫酸，沸水浴煮沸2分鐘，冷卻比色。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)含量，計(jì)算粗多糖含量。

5.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：

精密吸取葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液0.10，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00，1.50，2.00ml（分別相當(dāng)于葡聚糖0.01，0.02，0.04，0.06，0.08，0.10，0.15，0.20mg），補(bǔ)充水至2.0mL，加入苯酚溶液1.0ml，濃硫酸10ml，混勻，沸水浴2分鐘，混勻，沸水浴2分鐘，冷卻后用分光光度計(jì)在485nm波長處以試劑空白溶液為參比，測定吸光度值（A），以葡聚糖濃度為橫坐標(biāo)，A為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

6.計(jì)算

從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得樣品相應(yīng)含量，計(jì)算粗多糖含量。

7.注意事項(xiàng)

（1） 苯酚-H2SO4溶液可以和多種糖類進(jìn)行顯色反應(yīng)，常用于總糖的測定。所以測定過程中應(yīng)注意容器及試劑中其他糖類的干擾。

（2）苯酚-H2SO4溶液和不同類的糖反應(yīng)，顯色的強(qiáng)度略有不同，反映在標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率不同。如果已知樣品中糖的結(jié)構(gòu)，應(yīng)盡量以同類糖的純品做標(biāo)準(zhǔn)品，或以含有已知濃度的同類產(chǎn)品做對照品進(jìn)行檢測分析；如果樣品中糖的類型未知或結(jié)構(gòu)多樣，則只能以葡萄糖計(jì)或其他糖計(jì)報(bào)告結(jié)果。

（3） 試驗(yàn)證明葡萄糖、果糖等單糖，蔗糖、乳糖等雙糖、低聚糖--棉子糖，淀粉、糊精等多糖及甜味劑糖精不干擾粗多糖測定。

（4） 本方法由北京市衛(wèi)生防疫站建立，經(jīng)中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生研究所驗(yàn)證。

粗多糖的提取提取植物多糖主要根據(jù)其不同的溶解度來選擇不同的溶劑進(jìn)行提取。提取多糖最常用的溶劑有水、稀酸、稀堿以及二甲亞砜等。其中二甲亞砜雖然是一種提取多糖的良好溶劑,但價(jià)格昂貴,對人體有害,在使用上受到限制。用稀酸稀堿提取多糖時(shí),雖然多糖總量比水提取的得率高,但得到的多糖含量低,而且酸堿提取會(huì)引起多糖降解,影響其生物活性。用水提取多糖,成本低,不破壞生物活性,方便實(shí)用且安全性高。因此,先用體積分?jǐn)?shù)80%的乙醇處理原料以除去單糖、低聚糖、苷類、生物堿及蛋白等物質(zhì),再用傳統(tǒng)的水提工藝浸提多糖,通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)確定較優(yōu)的鮮山藥多糖水提醇沉工藝條件,并對精制的山藥多糖進(jìn)行初步鑒定,又用改良的苯酚-硫酸法測定了多糖含量4。

粗多糖的功效和作用粗多糖是指復(fù)合型雜多糖，主要有黏多糖、脂多糖、結(jié)合多糖(糖蛋白及黏蛋白)等。隨著科技的發(fā)展，粗多糖的保健功能越來越引起人們的重視。3

粗多糖的降血糖和防治糖尿病作用糖尿病是一組以高血糖為特征的綜合癥。研究表明，粗多糖有顯著的降血糖作用，用于糖尿病的輔助治療，所有患者癥狀均有明顯好轉(zhuǎn)。其降血糖機(jī)制主要有提高肝臟抗氧化能力，增強(qiáng)肝葡萄糖激酶活性。因此，粗多糖可用于保健食品及糖尿病的輔助治療。

粗多糖的降血脂作用大量研究表明，粗多糖能降低血漿總膽固醇，對抗實(shí)驗(yàn)性高膽固醇血癥的形成，使高脂血癥的血漿總膽固醇、甘油三酯、LDL(低密度脂蛋白膽固醇)及中性脂下降，HDL(高密度脂蛋白膽固醇)上升。而HDL被認(rèn)為是對機(jī)體有益的，因?yàn)樗茉鰪?qiáng)膽固醇通過肝臟的排泄。粗多糖還能與脂蛋白酯酶結(jié)合，促進(jìn)動(dòng)脈壁脂蛋白酯酶入血而粗多糖抗血凝、抗血栓作用

血栓形成主要包括三個(gè)階段：(1)血小板粘附和聚集;

(2)血液凝固;

(3)纖維蛋白溶解。

研究表明，粗多糖能明顯抑制血小板的粘附作用，并降低血液粘度，直接影響血栓形成的第一階段;粗多糖在體內(nèi)、體外均有顯著的抗凝作用，并減少血小板數(shù)，延長血凝從而也影響到血栓的形成;另外，粗多糖能提高纖維蛋白溶解的活力，起到溶解血栓的作用。由此可見，粗多糖能作用于血栓形成的所有環(huán)節(jié)。

粗多糖的增強(qiáng)機(jī)體免疫功能粗多糖能夠促進(jìn)單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬功能，增強(qiáng)機(jī)體自我保護(hù)的能力，有效的增強(qiáng)了機(jī)體體液免疫作用。大量藥理和臨床研究已發(fā)現(xiàn)，天然粗多糖對機(jī)體免疫功能的影響方式和途徑主要有3種：(1)激活巨噬細(xì)胞;(2)激活網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)，生物體內(nèi)的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)具有吞噬、排除老化細(xì)胞和異體及病原體的作用;(3)激活T和B的淋巴細(xì)胞。