[科普中國(guó)]-EGCG

簡(jiǎn)介

茶多酚的抗腫瘤作用已經(jīng)得到國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究人員的公認(rèn)，研究表明其主體成分兒茶素(占茶多酚總量70%～80%)發(fā)揮著主要功效。近年來科學(xué)工作者已經(jīng)越來越多將注意力集中于兒茶素上，尤其是其中的單體之一表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)最引人注目。

EGCG是茶葉特有的兒茶素，其量最高，占茶多酚制品的40%～50%。它是2一連苯酚基苯并吡喃與沒食子酸形成的酯，具有酚類抗氧化劑的通用性，同時(shí)因其結(jié)構(gòu)中有6個(gè)鄰位酚羥基而有優(yōu)于其他兒茶素的許多性質(zhì)。

基本信息純度：98%以上，檢測(cè)方法HPLC。

CAS:84650-60-2

中文別名:綠茶提取物;

英文名稱:(-)-epigallocatechin gallate

英文別名:EGCG; (2R,3R)-5,7-dihydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-3,4-dihydro-2H-chromen-3-yl 3,4,5-trihydroxybenzoate

分子式:C22H18O11

分子量:458.37172

物化性質(zhì)密度:1.9 g/cm3

沸點(diǎn):909.1°C at 760 mmHg

閃點(diǎn):320 ℃

蒸汽壓:3.71E-35 mmHg at 25 ℃

制備純化隨著人們對(duì)EGCG研究的深入，以及EGCG許多藥理作用被進(jìn)一步證實(shí)，分離制備EGCG單體純品已經(jīng)成為深入研究與應(yīng)用的需要。近年來，國(guó)內(nèi)外有許多關(guān)于提純制備EGCG的研究，利用了許多新興分離、制備方法，但主要還是以色譜分離為主。原理是利用兒茶素各單體之間的性質(zhì)差異，選擇不同的吸/脫附劑，使之得到分離3。

1 柱色譜以綠茶萃取物為原料，直接上填料柱，選用合適的洗脫劑進(jìn)行等度或梯度洗脫，并定性收集無交叉的流份，從而得到EGCG純品。

將茶多酚上硅膠柱后，用醋酸乙酯一甲苯進(jìn)行梯度洗脫，對(duì)洗脫成分每隔2 h取樣一次，進(jìn)行薄層色譜分離，F(xiàn)eCl。顯色，定性收集無交叉成分的洗脫樣品，進(jìn)行準(zhǔn)確減壓蒸餾，干燥，分離可得到EGCG、ECG、EC 3種幾茶素單體，質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為98．7%、99．2%、98。6%，且其中EGCG占茶多酚質(zhì)量分?jǐn)?shù)為51．6%。

2 柱色譜預(yù)分離制備型HPLC提純：以綠茶提取物為原料，經(jīng)柱色譜除去雜質(zhì)，并將兒茶素中幾種單體預(yù)分離為幾個(gè)組分后，再用制備型HPLC分離其中含EGCG的組分，可得到EGCG純品。

3 有機(jī)溶劑富集柱色譜純化：以綠茶提取物或茶多酚為原料，經(jīng)有機(jī)溶劑多次萃取，除去雜質(zhì)，提高兒茶素總純度后，再用柱色譜法分離可得EGCG單體。

4 高效液相色譜法以兒茶素粗品為原料，選擇、優(yōu)化出合適的柱操作條件，直接用HPLC分離出兒茶素單體。鐘世安等以粗幾茶素粉末為原料，采用反相高效液相色譜技術(shù)，收集相應(yīng)的餾份，再經(jīng)P一1大孔樹脂，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮洗脫液，冷凍干燥后，得到EGCG、GCG、ECG3種酯型兒茶素單體。

5 制備型高效逆流色譜法是一種較新型的液一液分配技術(shù)，于1982年由Ito首創(chuàng)，并在1994年將其改進(jìn)后，進(jìn)樣量增大，能夠分離克量級(jí)的樣品。

6 沉淀一吸附法利用兒茶素能與某些金屬形成金屬鹽沉淀，再用酸將其沉淀溶解，最后用柱色譜法除雜質(zhì)，可得到酯型兒茶素的單體。

7 超臨界流體萃取超臨界流體萃取技術(shù)是近20年才發(fā)展起來的新型分離技術(shù)。宓曉黎等以茶葉為原料，以甲醇為改性劑在CO2的超臨界壓力和溫度條件下進(jìn)行萃取，對(duì)改性劑、超臨界流體性質(zhì)、靜態(tài)萃取時(shí)間和動(dòng)態(tài)萃取流體CO2的量對(duì)萃取率的影響分別作了考察，確定了最佳萃取條件。對(duì)將超臨界流體萃取法應(yīng)用于制備EGCG的工業(yè)化作了有益的探索。

用途表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）是從中國(guó)綠茶中提取的一種成份，它是綠茶主要的活性和水溶性成份，是兒茶素中含量最高的組分，占綠茶毛重的9%-13%，因?yàn)榫哂刑厥獾牧Ⅲw化學(xué)結(jié)構(gòu)，EGCG具有非常強(qiáng)的抗氧化活性，抗氧化活性至少是維生素C的100多倍，是維生素E的25倍，能夠保護(hù)細(xì)胞和DNA受損害，這種損害相信與癌癥、心臟疾病和其他重大疾病有關(guān)，EGCG的這些功效歸結(jié)于他們對(duì)氧自由基的清除（抗氧化）能力。

表沒食子兒茶素沒食子酸酯在抗癌和心血管疾病方面擔(dān)當(dāng)了重要的角色。此外，它也用作腫瘤多藥耐藥性的逆轉(zhuǎn)劑，能夠改善癌細(xì)胞對(duì)化療的敏感性并減輕對(duì)心臟的毒性。

EGCG是綠茶茶多酚的主要組成成分，也是綠茶兒茶素類的主成分，兒茶素類包括EGCG、EGC、ECG、EC、 GCG等，其中抗氧化活性依次為 EC許多研究表明EGCG具有抗自由基DNA損害，抗輻射和紫外線，阻止油脂過氧化，減少血清中低密度膽固醇、超低密度膽固醇和甘油三酯的含量，干擾癌細(xì)胞生存所需的信號(hào)傳遞，抑制飲食中的致癌物質(zhì)，與腸、肝、和肺中的其他酶和抗氧化劑作用共同阻止某些致癌物質(zhì)的活力，清除自由基，抵御污染、日曬和吸煙的影響，防治皮膚老化和起皺。

藥理作用1 抗腫瘤作用：EGCG的抗腫瘤作用已經(jīng)得到了各國(guó)相關(guān)研究人員的認(rèn)可，而且已經(jīng)被列為一種潛在的抗癌新藥在中美等許多國(guó)家進(jìn)行研究。研究人員主要從以下方面人手。研究了EGCG對(duì)各種腫瘤的作用機(jī)制。

1.1 對(duì)某些促癌劑的抑制作用：給SENCAR小鼠外用TP，發(fā)現(xiàn)它對(duì)佛波酯和其他皮膚促癌劑有強(qiáng)的抑制作用，且各兒茶素單體中以EGCG作用最強(qiáng)。梁剛等跚以昆明純種小鼠的骨髓細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料，以環(huán)磷酰胺(CP)誘發(fā)的微核(MN)率和姐妹染色單體互換(SCE)頻率為指標(biāo)，研究EGCG對(duì)CP誘導(dǎo)小鼠骨髓細(xì)胞MN和SCE的影響，發(fā)現(xiàn)EGCG對(duì)MN和SCE均具明顯抑制作用。

1.2 抑制癌細(xì)胞的增殖：EGCG可明顯抑制乳腺癌細(xì)胞MDA—MB一435的增殖活性，且EGCG處理細(xì)胞株24 h后可檢測(cè)到p21 mRNA和蛋白表達(dá)提高，說明EGCG可抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖，推測(cè)機(jī)制可能與誘導(dǎo)p21表達(dá)從而抑制細(xì)胞周期的轉(zhuǎn)換有關(guān)口。用MTT法測(cè)定EGCG對(duì)甲狀腺癌FRO細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，發(fā)現(xiàn)EGCG顯著抑制FR()細(xì)胞的增殖，且隨著EGCG濃度的增加，F(xiàn)RO細(xì)胞的端粒酶活性逐漸降低，為EGCG應(yīng)用于甲狀腺癌的臨床治療提供了理論依據(jù)。

1.3 抑制某些與腫瘤有關(guān)的酶的活性：Suzuki等研究了EGCG對(duì)取自人結(jié)腸癌COL0201、子宮頸癌HeLa、肺癌A549細(xì)胞和非洲綠猴腎Vero細(xì)胞的拓?fù)鋵?dǎo)構(gòu)酶I及取自人胎盤的拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ的抑制作用。結(jié)果表明EGCG對(duì)25種酶均有強(qiáng)的抑制作用。

1.4 誘導(dǎo)癌細(xì)胞的凋亡：研究EGCG誘導(dǎo)大腸癌LoVo細(xì)胞、胃癌MGC一803細(xì)胞和肝癌BEL一7402細(xì)胞凋亡的作用及其凋亡相關(guān)基因bcl一2表達(dá)的影響。結(jié)果EGCG對(duì)這3種消化道細(xì)胞生長(zhǎng)均具有抑制作用[6]。張星海等發(fā)現(xiàn)兒茶素單體對(duì)前列腺癌細(xì)胞具有明顯的抑制和誘導(dǎo)凋亡作用，且作用效果順序?yàn)镋GCG>表兒茶素沒食子酸酯(ECG)>表沒食子兒茶素(EGC)。

1.5 提高某些細(xì)胞的細(xì)胞毒增敏作用：梁鋼等[8]研究?jī)翰杷爻煞諩CG、EGCG對(duì)人耐藥肝癌細(xì)胞BEL一7404/A和耐藥口腔細(xì)胞KBV200的細(xì)胞毒增敏作用，發(fā)現(xiàn)這2種兒茶素成分與抗腫瘤藥物聯(lián)合應(yīng)用可使P糖蛋白(p—gP)表達(dá)下降，能提高細(xì)胞內(nèi)羅丹明一123(Rh一123)的量，證明EGCG、ECG與阿霉素(ADM)或長(zhǎng)春新堿(VCR)聯(lián)合應(yīng)用可增強(qiáng)藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞BEL一7404/A和耐藥口腔細(xì)胞KBV200的細(xì)胞毒作用，并推測(cè)機(jī)制可能與降低腫瘤多藥耐藥基因MDRt—mRNA表達(dá)、下調(diào)P—gP表達(dá)及抑制P—gP的功能有關(guān)。為發(fā)現(xiàn)新的多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑和可能的作用靶點(diǎn)提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

2 抗氧化作用許多研究已經(jīng)揭示了TP的抗腫瘤、抗衰老等多種生物活性均與其抗氧化性有關(guān)，而且在各種TP抗癌的機(jī)制中，TP的抗氧化作用占有非常重要的地位。TP通過清除自由基、抑制過氧化、增強(qiáng)其他抗氧化劑作用等起到抗氧化作用。但在這些作用中，還是EGCG在發(fā)揮著主要功效。Guo等m1用ESR和化學(xué)發(fā)光技術(shù)，研究了兒茶素4種單體對(duì)超氧自由基的清除作用，結(jié)果表明以(一)一EGCG的清除能力最強(qiáng)。Osada等Ets]對(duì)兒茶素抑制膽固醇及低濃度脂肪蛋白氧化的作用進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)兒茶素抗銅促氧化能力順序?yàn)镋GCG—ECG>表兒茶素(EC)>C>EGC。祁祿等通過體外培養(yǎng)的Hip G2肝腫瘤細(xì)胞中NAD(P)H一醌還原酶(QR)的活性，對(duì)茶葉中的單體誘導(dǎo)代謝解毒酶活性的能力進(jìn)行了比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)EGCG作用有顯著性。

3 消臭、防齲作用茶多酚的除臭、防齲功能已經(jīng)被許多專家認(rèn)可，并且已經(jīng)應(yīng)用于日用化工產(chǎn)品中。如中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所研制的花露水一茗香露，保潔公司生產(chǎn)的佳潔士茶爽牙膏等。用氣相色譜法研究?jī)翰杷叵装?、硫化氫、吲哚氣味的機(jī)制，實(shí)驗(yàn)顯示，兒茶素各單體的消臭能力：EGCG>EGC>ECG>EC[1”。

4 抗紫外線輻射宋秀祖等研究了EGCG對(duì)紫外線輻射氧化損傷的保護(hù)機(jī)制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)EGCG能減少中波紫外線(UVB)輻射引起的丙二醛沉積，增加抗氧化酶的活性；并且可能抑制由UVB誘導(dǎo)的MMPl mRNA表達(dá)，減少膠原蛋白的降解。從而說明EGCG可以對(duì)UVB輻射損傷的體外培養(yǎng)的纖維細(xì)胞起到保護(hù)作用。

5 抑菌作用TP的抑菌作用已經(jīng)有許多報(bào)道，但一般認(rèn)為，具有沒食子基的EGCG、ECG比EC及ECG強(qiáng)。潘素君選用了大腸桿菌、蠟樣芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、枯草桿菌、沙門氏菌及多種霉菌和酵母菌為供試菌株，觀察幾種茶多酚的抑菌情況，發(fā)現(xiàn)多金農(nóng)脫咖啡因兒茶素比金農(nóng)大葉兒茶素和金農(nóng)小葉和兒茶素的抑菌效果強(qiáng)，而前者中EGCG的量恰恰比后兩者高。在對(duì)口腔細(xì)菌Porphy—romonal gingivalis生長(zhǎng)的抑制作用中，兒茶素各單體作用能力：EGCG>ECG>>EC、ECG。

安全性綠茶每天20杯的用量未見明顯副作用發(fā)生，研究報(bào)道小鼠口服劑量為2170mg/kg。