[科普中國]-酪蛋白類嗎啡肽

生物活性

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免疫活性作用淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能和紅細(xì)胞免疫功能。據(jù)推測，β一酪蛋白類嗎啡肽還能通過調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞增殖而促進(jìn)胎兒免疫系統(tǒng)的發(fā)育。乳中的β-酪蛋白類嗎啡肽具有抑制胃腸收縮和消化液分泌的功能1。

阿片活性作用神經(jīng)遞質(zhì)的作用，例如，β一酪蛋白的水解生成的酪啡肽片段的氨基酸排列順序與內(nèi)源性的阿片肽的N一末端排列順序相似。從β一酪蛋白的水解產(chǎn)物中進(jìn)一步純化出的六肽和四肽，在體外均具有阿片肽的活性，可以顯著抑制細(xì)胞腺苷酸環(huán)化酶活性，降低細(xì)胞內(nèi)cAMP水平，除酪蛋白外，小麥谷蛋白的胃蛋白酶水解產(chǎn)物中也存在有阿片肽作用的肽。

促進(jìn)激素分泌胰島素和胰增血糖素的分泌有促進(jìn)作用。當(dāng)動物預(yù)先攝食一定劑量的氨基酸和蔗糖，再攝食一定量的β一酪啡肽，激素的增加量要比直接飼喂β一酪啡肽提高7倍。這種作用很可能與調(diào)節(jié)攝食后葡萄糖利用率以及攝食行為有關(guān)。

對消化活動的作用中樞神經(jīng)系統(tǒng)和腸肌叢中的阿片受體結(jié)合，從而影響胃腸運(yùn)動。這種影響主要是延遲胃排空時間。抑制腸道轉(zhuǎn)運(yùn)消化物。近年來，歐洲一些研究人員接連報(bào)道了酪蛋白受胃腸適量蛋白酶作用后可以釋放出生物活性肽，改變了長期以來，把酪蛋白看作單純營養(yǎng)性蛋白質(zhì)的舊印象。

酶解與制備在食物蛋白水解研究中涉及到的酶類很多，包括細(xì)菌膠原酶、胰蛋白酶、地衣形芽孢桿菌堿性蛋白酶、嗜熱菌蛋白酶等等，還有胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶、木瓜蛋白酶、放線菌酶等，另外也可應(yīng)用植物蛋白酶，如無花果蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶等。有報(bào)道說微生物酶具有更高的選擇性，但單利用微生物酵解制取活性肽還沒見報(bào)道。

酶的選擇要求酶的專一性強(qiáng)，且不會隨著水解度的提高出現(xiàn)苦味。針對不同底物，選用不同的混合酶。通常選擇胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的混合物，因?yàn)橐鹊鞍酌改軐Ｒ恍缘呐c賴氨酸或精氨酸殘基結(jié)合，而胰凝乳蛋白酶僅能水解酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸殘基的肽鍵。

在對酪啡肽水解制備的研究中，尤以胃蛋白酶等動物消化蛋白酶最為常見。并且每一種酶都有自己的專一切割位點(diǎn)。在體外對牛β一酪蛋白利用胃腸蛋白酶進(jìn)行水解，可以釋放出β一酪啡肽一72。

分離純化編輯

1、通過Bio-Gelp-2、、氨基酸分析儀、質(zhì)譜分析通過峰值比較得到B一酪啡肽樣物質(zhì)。

2、通過反相液相色譜十八烷醇酯硅膠柱，用線性梯度的乙睛，含有0.1%—氯乙酸在流速10ml/min進(jìn)行洗脫。阿片肽片段可以通過苯乙基硅膠柱和氰基丙烷硅膠進(jìn)一步純化。

3、用反相液相色譜，毛細(xì)管電泳，免疫印記的等電聚焦分離綿羊酪蛋白的方法已經(jīng)得到評估。通過電子噴霧離子質(zhì)譜分析和矩陣幫助激光吸收作為一種鑒別蛋白成分的工具。

4、使用毛細(xì)管電泳一激光誘導(dǎo)熒光一增強(qiáng)型電荷耦合器件系統(tǒng)，用異硫氰酸熒光素柱前衍生了亮腦啡肽、甲硫腦啡肽、血管緊張肽、P物質(zhì)4種生物活性肽。

5、利用競爭抑制酶聯(lián)免疫分析方法，對酪蛋白經(jīng)胃蛋白酶水解產(chǎn)生的物質(zhì)進(jìn)行了定量分析。

生物學(xué)鑒定以富含阿片受體的雜交瘤細(xì)胞株，在有和無阿片特異性拮抗劑納洛酮存在的情況下，與酪蛋白及其胃蛋白酶酶解消化液共同孵育。其細(xì)胞抽提液用125I標(biāo)記試劑盒進(jìn)行放免測定，觀察對細(xì)胞腺苷酸環(huán)化酶活性的影響。結(jié)果證明，酪蛋白經(jīng)胃蛋白酶處理后有阿片樣活性物質(zhì)釋放3。