三糖鐵培養(yǎng)基是一種細(xì)菌培養(yǎng)基,主要是用來鑒別沙門氏與志賀氏菌屬等腸道桿菌,主要成分包括有牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、乳糖、硫酸亞鐵、氯化鈉、硫代硫酸鈉、酚紅、瓊脂、蒸餾水等。如同時(shí)含1%蔗糖,即成三糖鐵培養(yǎng)基。
三糖鐵培養(yǎng)基簡介1、用途:用以鑒別沙門氏與志賀氏菌屬等腸道桿菌。
2、主要成分:有牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、乳糖、硫酸亞鐵、氯化鈉、硫代硫酸鈉、酚紅、瓊脂、蒸餾水等。如同時(shí)含1%蔗糖,即成三糖鐵培養(yǎng)基。
3、主要成分的作用:
①本培養(yǎng)基用以觀察細(xì)菌對糖的分解能力及是否產(chǎn)生硫業(yè)氫,可初步鑒別細(xì)菌的類屬。
大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖而產(chǎn)酸產(chǎn)氣,使斜面與底層均呈黃色、且底層有氣泡。傷寒桿菌、痢疾桿菌只能發(fā)酵葡萄糖而不分解乳糖,分懈葡萄糖產(chǎn)酸使pH降低,因此,斜面和底層先都呈黃色,但因葡萄糖含量較少,所生成少量的酸可因接觸空氣而氧化,并因細(xì)菌生長繁殖較盛,分解氨基酸產(chǎn)生的堿性物質(zhì)較多,致使斜面部分又變成紅色;底層由于是在缺氧狀態(tài)下,細(xì)菌分解葡萄糖所生成的酸類一時(shí)不被氧化而仍保持黃色。
②細(xì)菌若分解含硫氨基酸產(chǎn)生硫化氫,則與培養(yǎng)基中硫酸亞鐵化合成黑色的硫化鐵。
③硫代硫酸鈉能防止硫化氫被氧化,而影響硫化鐵的形成。
④酚紅為指示劑,酸性時(shí)呈黃色,堿性時(shí)呈紅色。
⑤若細(xì)菌具有動(dòng)力,可在底層穿刺線四周出現(xiàn)擴(kuò)散生長現(xiàn)象,無動(dòng)力的細(xì)菌則僅在穿刺線上生長1。
其他類型的培養(yǎng)基肉湯培養(yǎng)基1、用途:供血液、骨髓標(biāo)本的增菌培養(yǎng),亦適用于燒傷標(biāo)本的細(xì)菌快速檢驗(yàn)及一般菌的增菌培養(yǎng)。
2、主要成分:有水、蛋白胨、牛肉膏、氯化鈉、葡萄糖、枸櫞酸鈉、硫酸鎂、青霉素酶、對氨苯甲酸、酚紅溶液等。
3、各成分的作用:
①蛋白胨、牛肉膏:為主要氮源,供細(xì)菌合成菌體蛋白質(zhì),以供生長繁殖之用(亦可供給能量),也有維持滲透壓的作用。
②葡萄糖:為主要碳源,供給細(xì)菌新陳代謝活動(dòng)所需要的能量。
③氯化鈉:供細(xì)菌生長需要的無機(jī)鹽,其作用為維持滲透壓、構(gòu)成菌體成分和酶的激動(dòng)劑。
④枸櫞酸鈉:為抗凝劑,不使血液凝固成塊,因此,可減少白細(xì)胞對病原菌的吞噬機(jī)會(huì)。
⑤對氨苯甲酸:能中和血中磺胺類藥物的抑菌作用。
⑥硫酸鎂:能破壞血中四環(huán)素、金霉素、土霉素、新霉素及多粘菌素等的抑菌作用。
⑦青霉素酶:可破壞青霉素。
⑧酚紅:為指示劑,細(xì)菌生長后分解葡萄糖產(chǎn)酸,使培養(yǎng)基pH降低,酚紅指示劑變黃,培養(yǎng)液呈黃色,即可知有細(xì)菌生長。
⑨水:是細(xì)菌的營養(yǎng)、代謝過程中不可缺少的物質(zhì),水又是良好的溶劑,培養(yǎng)基中的許多營養(yǎng)物質(zhì)均須溶于水才能被細(xì)菌吸收。
伊紅美藍(lán)瓊脂1、用途:分離腸遭致病菌。
2、主要成分:有無糖瓊脂、乳糖、伊紅和美藍(lán)水溶液。
3、伊紅、美藍(lán)及乳糖的作用:伊紅為酸性染料、美藍(lán)為堿性染料,后者有抑制革藍(lán)氏陽性細(xì)菌生長的作用,(但某些鏈球菌仍能生長),同時(shí)也起著指示劑的作用。當(dāng)大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸,細(xì)菌處于酸性環(huán)境中,菌體帶正電,易與酸性染料伊紅結(jié)合,而伊紅與美藍(lán)又結(jié)合成1種復(fù)合物,故菌落不是紅色而呈有金屬光澤之紫紅色。痢疾桿菌等不能分解乳糖,亦不產(chǎn)酸,伊紅和美藍(lán)不能結(jié)合,則細(xì)菌菌落為無色。綠膿桿菌、變形桿菌等有時(shí)可分解培養(yǎng)基中的蛋白胨而產(chǎn)堿,此時(shí)菌體帶負(fù)電遂吸附美藍(lán)使菌落著藍(lán)色。由于這種培養(yǎng)基有鑒別某些細(xì)菌的作用,故稱鑒別培養(yǎng)基。
SS瓊脂1、用途:是分離沙門氏菌屬及志賀氏菌屬的培養(yǎng)基。它對大腸桿菌有較強(qiáng)的抑制作用,而對腸道病原菌則無明顯抑制作用,因此,可以增加糞便等標(biāo)本的接種量,從而提高病原菌的檢出率,它是目前公認(rèn)比較滿意的選擇性培養(yǎng)基。
2、主要成分:有蛋白胨、肉膏、瓊脂、煌綠、膽鹽、硫代硫酸鈉、枸櫞酸鈉、枸櫞酸鐵、乳糖、中性紅、水等。
3、各成分主要的作用:
①肉膏、蛋白胨等為營養(yǎng)物質(zhì)。
②枸櫞酸鈉、硫代硫酸鈉、膽鹽及煌綠等能抑制革藍(lán)氏陽性細(xì)菌及大腸桿菌類細(xì)菌的生長。而膽鹽又能促進(jìn)沙門氏菌的生長。硫代硫酸鈉能防止硫化氫被氧化,而影響硫化鐵的形成。
③中性紅為指示劑,酸性時(shí)呈紅色,堿性時(shí)呈黃色。
④大腸桿菌能分解乳糖,而多數(shù)病原菌不能分解乳糖。由于大腸桿菌迅速分解乳糖而產(chǎn)酸,使膽鹽呈膽酸析出,因而形成中心渾濁及指示劑變色而呈深紅色菌落。沙門氏及志賀氏菌屬,通常不分解乳糖而分解蛋白胨產(chǎn)生堿性物質(zhì),故呈現(xiàn)透明的微黃色菌落。某些變形桿菌及沙門氏菌之菌落中心可顯黑色,因?yàn)檫@些細(xì)菌產(chǎn)生硫化氫與枸櫞酸鐵中的鐵離子結(jié)合,形成黑色硫化鐵。
⑤硫化硫酸鈉有緩和膽鹽對志賀氏菌及沙門氏菌的抑制作用,并中和煌綠、中性紅等染料毒性,且能使大腸桿菌的紅色菌落顏色更鮮明。
⑥SS瓊脂是抑制能力強(qiáng)的選擇性培養(yǎng)基,可以大量接種糞便標(biāo)本2。
本詞條內(nèi)容貢獻(xiàn)者為:
梁志宏 - 副教授 - 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)