SIgE的產(chǎn)生部位與SIgA相似,也由呼吸道黏膜固有層中的漿細(xì)胞產(chǎn)生,分布于黏膜組織及外分泌液中,這些產(chǎn)生部位正是過(guò)敏原的侵入門(mén)戶(hù)和過(guò)敏反應(yīng)好發(fā)部位。正常值
0.1-9mg/L。
臨床意義IgE是單體,8S,19×104 ku,其重鏈較γ鏈長(zhǎng)。多一個(gè)功能區(qū)(CH4),借此可與細(xì)胞(如肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞)結(jié)合,在一定條件下觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)生物活性物質(zhì)釋放,故稱(chēng)IgE是引起Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的主要抗體。支氣管哮喘及過(guò)敏性肺炎患者,其痰中SIgE含量可增高。
注意事項(xiàng)ELISA中的主要試劑成份如抗原、抗體、酶結(jié)合物、底物等,如制備不當(dāng)或保存不妥,均易變質(zhì)失活。ELISA的步驟多,操作如不合規(guī)范,難于得到準(zhǔn)確的結(jié)果。因此為保證檢測(cè)的有效性,每次試驗(yàn)必須進(jìn)行質(zhì)量控制。優(yōu)良的試劑盒中提供的陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照一般可作為試驗(yàn)的質(zhì)控品,按其說(shuō)明操作,從所得的吸光度值可以判斷試驗(yàn)的有效性。以臨床檢驗(yàn)中最常用的HBsAg檢測(cè)為例,試劑盒中的陰性對(duì)照應(yīng)為HBsAg陰性的人血清,陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)標(biāo)明HBsAg含量(例如9±2ng/ml)。每批試驗(yàn)應(yīng)同時(shí)作3份陰性對(duì)照和二份陽(yáng)性對(duì)照。陰性對(duì)照測(cè)定所得吸光度值應(yīng)小于某一數(shù)值(例如0.100),而陽(yáng)性對(duì)照吸光度均值減去陰性對(duì)照吸光度均值應(yīng)大于某一數(shù)值(例如0.200)。這些數(shù)值為該試劑盒在規(guī)定的測(cè)定條件下,特定的實(shí)驗(yàn)值。因此如測(cè)定結(jié)果符合要求,既表明所用試劑的有效性,又表明操作的正確性,只有在這種情況下,該批試驗(yàn)方為有效。 有的試劑盒中所含陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照不符合作為質(zhì)控品的要求,或?qū)嶒?yàn)室的測(cè)定條件如比色計(jì)等,與試劑盒說(shuō)明中的不同,則應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況采用合適的質(zhì)控品和從實(shí)驗(yàn)得出的本實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)控值。商品的質(zhì)控血清價(jià)格昂貴。定性測(cè)定ELISA的質(zhì)控品一般可自行制備。仍以HBsAg檢測(cè)為例。陰性對(duì)照可取自用高質(zhì)量試劑檢測(cè)為HBsAg陰性的獻(xiàn)血員。陽(yáng)性對(duì)照的制備可在陰性對(duì)照血清中加入適量的HBsAg陽(yáng)性血清,將此混合血清與參照標(biāo)準(zhǔn)品或定量質(zhì)控品作對(duì)比測(cè)定,標(biāo)定其HBsAg含量。然后進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂專(zhuān)玫剿铦舛鹊腍BsAg陽(yáng)性血清,再加入適量抗菌防腐劑如慶大霉素和柳硫汞后,分裝低溫凍存。
1本詞條內(nèi)容貢獻(xiàn)者為:
熊玉娟 - 副主任技師 - 廣東省中醫(yī)院 檢驗(yàn)科