[科普中國]-激素檢測(cè)方法

激素測(cè)定就是對(duì)動(dòng)物體液或者組織的激素含量進(jìn)行測(cè)定，它能夠有效地反映出激素的正常水平，從而確定人體是否達(dá)到健康的狀態(tài)，激素測(cè)定方法可分為多種，包括生物、化學(xué)鑒定細(xì)胞、化學(xué)鑒定等等。隨著現(xiàn)代化醫(yī)學(xué)技術(shù)的提高，激素測(cè)定的方法也越來越完善，種類也越來越多樣。1

簡(jiǎn)介激素檢測(cè)方法通常用的方法有免疫測(cè)定法，放射免疫測(cè)定法，受體結(jié)合測(cè)定法和血漿蛋白結(jié)合測(cè)定法。世界衛(wèi)生組織根據(jù)其測(cè)定原理對(duì)蛋白結(jié)合測(cè)定法提出新的分類標(biāo)準(zhǔn)和統(tǒng)一命名。這些分類標(biāo)準(zhǔn)包括：①在測(cè)定中是否需要標(biāo)記物；②標(biāo)記的是被測(cè)物還是結(jié)合蛋白；③在測(cè)定系統(tǒng)中被測(cè)物過量還是結(jié)合蛋白過量；④測(cè)定的是被測(cè)物本身（直接法）還是結(jié)合蛋白（間接法）；⑤在測(cè)定系統(tǒng)中是否需要分離步驟。1

主要類型免疫測(cè)定法

不用標(biāo)記物的蛋白結(jié)合測(cè)定法——免疫測(cè)定法 基于被測(cè)物（抗原）與其特異結(jié)合蛋白（抗體）結(jié)合時(shí)所出現(xiàn)的沉淀線作為測(cè)定指標(biāo)的，在測(cè)定系統(tǒng)中加入的抗體是過量的。操作較為迅速和方便。但這一測(cè)定法只適應(yīng)于測(cè)定大分子物質(zhì)，被測(cè)物的濃度較高，只有這樣才形成能用肉眼看到的抗原-抗體復(fù)合物，這類方法應(yīng)用較少。

放射免疫測(cè)定法

標(biāo)記抗原的免疫測(cè)定法——放射免疫測(cè)定法 這是以標(biāo)記抗原和未標(biāo)記抗原與同一抗體的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)為基礎(chǔ)的。隨著未標(biāo)記抗原增加，在反應(yīng)系統(tǒng)中復(fù)合物中標(biāo)記的抗原越來越少，因而在儀器上所測(cè)到的放射性記數(shù)也越來越少，由此可以作出一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，并從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出被測(cè)樣品的含量。放射免疫測(cè)定法既能測(cè)定蛋白質(zhì)類的大分子物質(zhì)，也能測(cè)定半抗原一類的小分子物質(zhì)。放射免疫測(cè)定法的靈敏度高，樣品用量少，并便于自動(dòng)化操作。放射免疫測(cè)定法屬結(jié)合蛋白（抗體）限量測(cè)定，標(biāo)記的是被測(cè)物（抗原），所以它屬于直接測(cè)定。

免疫放射計(jì)量測(cè)定法

標(biāo)記抗體的免疫測(cè)定——免疫放射計(jì)量測(cè)定法 這是標(biāo)記特異抗體。在反應(yīng)系統(tǒng)中加入過量的標(biāo)記抗體以便使全部被測(cè)抗原與之結(jié)合，然后，將結(jié)合和未結(jié)合的抗體分開。用吸附劑除去未結(jié)合的抗體，因此最后在儀器上測(cè)到的是結(jié)合型的抗體，這是一種間接測(cè)定，并且是一種過量蛋白結(jié)合試劑測(cè)定法。它與放射免疫測(cè)定法有本質(zhì)上的區(qū)別。過量蛋白結(jié)合試劑測(cè)定法反應(yīng)迅速，反應(yīng)更為靈敏，但特異性較差。為了克服這一不足，有人發(fā)展了一種夾心面包免疫放射計(jì)量測(cè)定法，大大提高了特異性和靈敏度。

非同位素標(biāo)記的免疫測(cè)定 除用同位素作標(biāo)記物之外，還有許多化合物可用作標(biāo)記物。如酶、熒光素、病毒、金屬、紅細(xì)胞、乳酸和其他許多特異顯色顆粒。非同位素免疫測(cè)定的命名可按放射免疫命名的格式來表示。如：放射免疫測(cè)定、酶免疫測(cè)定、熒光免疫測(cè)定和病毒免疫測(cè)定等。

用非同位素標(biāo)記抗體的免疫計(jì)量測(cè)定，也可仿照免疫放射計(jì)量測(cè)定法的命名來表示。如：免疫酶計(jì)量測(cè)定；免疫熒光計(jì)量測(cè)定。1

抗體選擇血液中類固醇激素檢測(cè)使用的抗體具有高度特異性，但大多數(shù)用于糞便中 類固醇激素檢測(cè)的抗體具有群體特異性，有相 同結(jié)合部位的所有激素代謝物都可以被檢測(cè)到。 雖然如此，在抗體選擇時(shí)需盡量選擇實(shí) 驗(yàn)物種的特異性抗體，如果沒有，可以考慮近緣 物種的抗體。因?yàn)椴煌惾?，甚至同一物種的 不同種群，類固醇激素的產(chǎn)物也可能不同，如在鳥類和小型哺乳動(dòng)物中最主要的糖皮質(zhì)激素是 皮質(zhì)酮，而中大型哺乳動(dòng)物及魚類中，主要的糖 皮質(zhì)激素是皮質(zhì)醇。1

基本原理免疫測(cè)定法：利用不同的標(biāo)志物與蛋白質(zhì)的結(jié)合進(jìn)行測(cè)定。基于被測(cè)物 與抗體結(jié)合時(shí)所出現(xiàn)的沉淀線，從而測(cè)定激素的含量到底有多少。操作較為迅速和方便。每一次聽法的適用范圍比較有限，通常只能測(cè)定大分子物質(zhì)，能用肉眼看到的抗原-抗體復(fù)合物。

放射免疫測(cè)定法：通過對(duì)抗原的標(biāo)記，來測(cè)定抗原抗體的結(jié)合物，形成同一抗體的競(jìng)爭(zhēng)性的反應(yīng)為基礎(chǔ)的。這種方法不僅能夠測(cè)蛋白質(zhì)類的大分子物質(zhì)，而且還能夠測(cè)定小分子物質(zhì)。放射免疫測(cè)定法的靈敏度高，屬于直接測(cè)定。

免疫放射計(jì)量測(cè)定法：這一種標(biāo)記抗體的特異性檢測(cè)。在反應(yīng)系統(tǒng)中加入過量的標(biāo)記抗體以確保能夠和反應(yīng)物中的全部抗原結(jié)合。這是一種間接測(cè)定，反應(yīng)迅速，反應(yīng)更為靈敏。能夠適應(yīng)于各種人群的檢測(cè)，其適應(yīng)性也非常強(qiáng)。

本詞條內(nèi)容貢獻(xiàn)者為:

趙陽國 - 副教授 - 中國海洋大學(xué)