mRNA起始部位的堿基序列,為mRNA與核糖體的結(jié)合位點稱SD序列(Shine-Dalgarno sequence)。在DNA上相應(yīng)的位點也稱SD序列,一般位于操縱基因和第一個結(jié)構(gòu)基因之間,部分序列與操縱基因重疊。對于阻遏型操縱子則位于衰減子與第一個結(jié)構(gòu)基因之間,部分序列與衰減子重疊。1
形成過程在原核生物中,起始密碼子的選擇取決于核糖體的小亞基與mRNA模板之間的相互作用。30S亞基與處于緊靠正確起始密碼子上游的富含嘌呤的mRNA模板結(jié)合,這個區(qū)稱為SD序列(Shine—Dalgarno sequence),它與16S rRNA 3'端的一個富含嘧啶區(qū)互補。在起始復(fù)合物形成過程中,這些互補的核苷酸配對形成可使mRNA與核糖體結(jié)合的雙鏈RNA結(jié)構(gòu),結(jié)果將起始密碼子定位在核糖體的P位。2
作用SD序列的作用是與16S rRNA的3'端上一段富含嘧啶的序列結(jié)合,小亞基16S rRNA的3'端的這個小片段就被稱為反SD序列。當(dāng)mRNA中的SD序列于16S rRNA上的反SD序列結(jié)合后,就指示了下游的AUG,即是蛋白質(zhì)合成的起始密碼子。3
翻譯影響一般來說,mRNA與核糖體的結(jié)合程度越強,翻譯的起始效率就越大,而這種結(jié)合程度主要取決于SD序列與16S rRNA的堿基互補性,其中以GGAG 4個堿基序列尤為重要。對多數(shù)基因而言,這4個堿基中任何一個換成C或T,均會導(dǎo)致翻譯效率大幅度洚低。SD序列與起始密碼子AUG之間的序列對翻譯起始效率的影響則表現(xiàn)在堿基組成和間隔長度兩個方面。實驗結(jié)果表明,SD序列后面的堿基若為AAAA或UUUU,則翻譯效率最高,而為CCCC或GGGG的翻譯效率剛分別是最高值的50%和25%。緊鄰AUG的前3個堿基對翻譯起始效率也有影響,對于大腸桿菌β一半乳糖苷酶的mRNA麗言,在這個位置上最佳的堿基組合是UAU或CUU,如果用UUC,UCA或AGG取代之,財酶的表達水平降為1/20。
SD序列與起始密碼子之間的精確距離保證了mRNA在核糖體上定位后,翻譯起始密碼子AUG正好處于核糖體中的P位,這是翻譯啟動的前提條件。在很多情況下,SD序列位于AUG之前大約7個堿基處,在此間隔中少一個或多一個堿基,均會導(dǎo)致翻譯起始效率不同程度的降低。大腸桿菌中的起始tRNA分子可以同時識別AUG、GUG和UUG3種密碼子,但其識別頻率并不相同,通常GUG為AUG的50%,而UUG只及AUG的25%。mRNA 5'端非編碼區(qū)自身形成的特定二級結(jié)構(gòu)能協(xié)助SD序列與核糖體結(jié)合,任何錯誤的空間結(jié)構(gòu)均會不同程度地削弱mRNA于核糖體的結(jié)合強度。4
本詞條內(nèi)容貢獻者為:
魏大勇 - 副教授 - 西南大學(xué)